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白介素1β（Interleukin-1β，IL-1β）是一種重要的促炎細(xì)胞因子，在免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)及多種疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用。其異常表達(dá)與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病以及多種癌癥密切相關(guān)。因此，精準(zhǔn)檢測(cè)IL-1β的濃度對(duì)于疾病機(jī)制研究和臨床診斷具有重要意義。ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）技術(shù)因其高特異性、高靈敏度和操作簡(jiǎn)便，成為檢測(cè)IL-1β的主流方法。

檢測(cè)原理

白介素1βELISA試劑盒主要基于雙抗體夾心法。其檢測(cè)原理如下：

1.預(yù)包被與樣本捕獲：將特異性抗IL-1β單克隆抗體固定于酶標(biāo)板孔中，樣本中的IL-1β通過抗原-抗體反應(yīng)被捕獲。

2.檢測(cè)抗體結(jié)合：加入標(biāo)記有二抗，與被捕獲的IL-1β形成“抗體-抗原-二抗”復(fù)合物。

3.信號(hào)放大與顯色：加入鏈霉親和素（Streptavidin）-辣根過氧化物酶（HRP）復(fù)合物，隨后加入顯色底物TMB。在HRP的催化下，TMB發(fā)生氧化反應(yīng)，生成藍(lán)色產(chǎn)物，加入終止液后變?yōu)辄S色。產(chǎn)物的吸光度（450nm）與樣本中IL-1β的濃度呈正比。

產(chǎn)品特點(diǎn)

-高靈敏度：優(yōu)化的抗體設(shè)計(jì)使得檢測(cè)下限可達(dá)極低水平，如人IL-1β檢測(cè)下限可達(dá)5.8 pg/mL。

-高特異性：通過抗體篩選和優(yōu)化，交叉反應(yīng)率極低，與IL-1α等類似物無明顯干擾。

-操作簡(jiǎn)便：標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程和試劑配置，使得檢測(cè)過程簡(jiǎn)單易行。

操作步驟

1.準(zhǔn)備工作：仔細(xì)閱讀試劑盒說明書，準(zhǔn)備好所有試劑和器材，包括酶標(biāo)儀、微量加樣器等。

2.樣本處理：根據(jù)要求對(duì)樣本進(jìn)行稀釋或離心處理。

3.加樣：將處理后的樣本加入酶標(biāo)板孔中。

4.加酶標(biāo)抗體：加入標(biāo)記的二抗。

5.溫育：在規(guī)定溫度和時(shí)間下進(jìn)行溫育。

6.洗滌：用洗滌液清洗反應(yīng)孔，去除未結(jié)合的抗體。

7.顯色：加入顯色液，產(chǎn)生顏色變化。

8.終止反應(yīng)：加入終止液，停止反應(yīng)。

9.測(cè)定：用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算IL-1β濃度。

應(yīng)用場(chǎng)景

白介素1βELISA試劑盒廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域：

-基礎(chǔ)研究：用于研究炎癥機(jī)制、細(xì)胞信號(hào)通路等，如解析TLR4/NF-κB通路在胰腺炎中的作用。

-臨床診斷：檢測(cè)患者血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清中的IL-1β濃度，輔助診斷炎癥性疾病。

-藥物研發(fā)：評(píng)估藥物對(duì)IL-1β表達(dá)的影響，助力抗炎藥物的研發(fā)。

注意事項(xiàng)

-樣本保存：樣本需妥善保存，避免反復(fù)凍融。血清樣本可保存于2-8℃不超過1周，-20℃不超過30天，-80℃可長(zhǎng)期保存。

-操作規(guī)范：嚴(yán)格遵循試劑盒說明書操作，避免交叉污染。

-安全防護(hù)：操作過程中需佩戴防護(hù)裝備，避免接觸酸性終止液。

白介素1βELISA試劑盒憑借其高靈敏度、高特異性和簡(jiǎn)便操作，已成為研究和臨床檢測(cè)IL-1β的工具。其在炎癥研究、疾病診斷和藥物開發(fā)中的廣泛應(yīng)用，為相關(guān)領(lǐng)域的研究和實(shí)踐提供了有力支持。  上一篇 沒有了 下一篇 「科研助力計(jì)劃」——C6細(xì)胞系特惠活動(dòng)